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Haokebio? Rapid miRNA FISH?Kit (Plant)
Haokebio? Rapid miRNA FISH?Kit (Plant)
Haokebio? Rapid miRNA FISH?Kit (Plant)

Haokebio? Rapid miRNA FISH?Kit (Plant)

  • 價格¥4200
  • 規(guī)格30T
  • 貨號HKR13Z
  • 單位
  • 品牌HaoKebio
產(chǎn)品介紹

【產(chǎn)品信息】

產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號30T保存有效期
洗液*5(粉末溶解于2L ddH2O)HKR12-12L*5短期4℃長期-20℃12個月
蛋白酶 K(100x)HKR12-230uL
AP-鼠抗地高辛(100x)HKR12-330uL
NBT顯色液A(20x)HKR12-4A150uL
NBT顯色液B(20x)HKR12-4B150uL
封閉液HKR12-53mL
探針HKR13-63mL

【產(chǎn)品簡介】

RNA快速雜交試劑盒,該試劑盒具有簡易快速的操作流程,能顯著縮短實驗時間。其特色在于采用單觸發(fā)4輪擴增探針。當(dāng)探針與靶序列結(jié)合后,會暴露擴增序列從而引發(fā)樹枝狀雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(HCR),形成巨大的核酸聚合物。每條核酸鏈均標(biāo)記有地高辛(DIG),可通過抗體檢測實現(xiàn)顯色可視化。

【組織固定】

組織類型動物組織植物組織冰凍樣本細(xì)胞爬片細(xì)胞腸道miRNA
處理方式  室溫固定12h-24,石蠟包埋。 抽真空固定1h(200mmHg),室溫固定12h-24,石蠟包埋。15%蔗糖4℃脫水8小時,30%蔗糖4℃脫水8小時,OCT包埋。4°固定2h左右。換pbs運輸4°。 細(xì)胞沉淀,4℃固定2h,換pbs運輸4°,瓊脂糖包埋。卡諾氏固定液室溫2h,換70%乙醇運輸。室溫固定120h左右,石蠟包埋。

【儲存與運輸】

冰袋(wet ice)運輸;-20℃長期保存,短期于4℃保存,有效期6個月。

【使用方法】

1. 脫蠟至水

依次將切片放入二甲苯Ⅰ15 min-二甲苯Ⅱ15 min-二甲苯Ⅲ15 min-無水乙醇10 min-90%酒精10 min-80%酒精10 min -70%酒精10 min -純水沖洗。

2. 修復(fù)

細(xì)胞樣本:等待切片完全干燥后,用組畫筆(推薦HKR14P原位雜交專用組畫筆)畫出大小合適的疏水圈,在原位雜交儀中或濕盒中水平放置切片。將100ul蛋白酶K修復(fù)液(1X)滴于組織上,37℃孵育10min,純水沖洗終止反應(yīng)。

冰凍切片:細(xì)胞樣本:等待切片完全干燥后,用組畫筆(推薦HKR14P原位雜交專用組畫筆)畫出大小合適的疏水圈,在原位雜交儀中或濕盒中水平放置切片。將100ul蛋白酶K修復(fù)液(1X)滴于組織上,37℃孵育20min(冰凍切片),純水沖洗終止反應(yīng)。

石蠟切片:將裝入玻片的玻片架放入修復(fù)槽,倒入1x檸檬酸6.0修復(fù)液(樣本區(qū)域須被浸沒),蓋上蓋子,用膠帶紙封住,放入微波爐中,中火8min,停8min,中低火8min。自然冷卻降溫。

3. 封閉

取出切片,甩干切片上的液體,用組畫筆畫出大小合適的疏水圈,在原位雜交儀中或濕盒中水平放置切片,每張切片滴加100ul封閉液,37℃孵育30min,洗滌1次,每次5min。洗滌步驟:將裝入玻片的玻片架放入洗液缸,倒入洗液(樣本區(qū)域須被浸沒),置于搖床上5min,轉(zhuǎn)速為60。

4. 探針雜交

甩干切片上的液體,每張切片滴加100ul的探針,37℃孵育2h-3h,注意保持濕度以防干片。洗滌5次,每次5min。洗滌步驟:將裝入玻片的玻片架放入洗液缸,倒入洗液(樣本區(qū)域須被浸沒),置于搖床上5min,轉(zhuǎn)速為60。

5. AP-鼠抗地高辛

甩干切片上的液體,每張切片滴加100ul的AP-鼠抗地高辛(1x),37℃濕盒孵育40min;洗滌5次,每次5min。洗滌步驟:將裝入玻片的玻片架放入洗液缸,倒入洗液(樣本區(qū)域須被浸沒),置于搖床上5min,轉(zhuǎn)速為60。

6. 顯色

每張切片滴加100ul的顯色液(1mL去離子水加50ul顯色液A和50ul顯色液B),室溫孵育30min。純水沖洗,終止反應(yīng)。自然風(fēng)干后,滴加封片劑封片。

【注意事項】

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本產(chǎn)品僅作科研用途。

【說明書下載】

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